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分光光度計及使用維護中的注意事項
一、 分光光度計檢定(測試)的主要項目對分析結果的影響:
1)波長準確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應於(yu) 樣品吸收光譜中的某一個(ge) 吸收峰的波長。由於(yu) 儀(yi) 器的製造和調整誤差,單色光的實際波長與(yu) 儀(yi) 器的波長讀數值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長準確度要求允許寬些。但是,當吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩(liang) 側(ce) 邊緣比較陡直,此時波長準確度的影響就必須引起注意。
2)透射比(吸光度)準確度
很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結果的可信性越差,從(cong) 而影響到測試數據的準確性.
3)雜散光
雜散光是由於(yu) 光學元件製造誤差以及光學和機械零件表麵的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結果帶來一定的誤差。在紫外的短波區域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀(yi) 器性能的一項重要指標。
二、與(yu) 分光光度計正確使用和維護有關(guan) 的幾個(ge) 注意事項 (在使用儀(yi) 器前,必須仔細閱讀其使用說明書(shu) )
1)若大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡後,重新校正“0”和“100%”點。然後再測量。
2)指針式儀(yi) 器在未接通電源時,電表的指針必須位於(yu) 零刻度上。若不是這種情況,需進行機械調零。
3)比色皿使用完畢後,請立即用蒸餾水衝(chong) 洗幹淨,並用幹淨柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表麵光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5)WFZ800-DA、756型等分光光度計,由於(yu) 其光電接收裝置為(wei) 光電倍增管,它本身的特點是放大倍數大,因而可以用於(yu) 檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產(chan) 生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀(yi) 器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露於(yu) 光下,因此在預熱時,應打開比色皿蓋或使用擋光杆,避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
6)放大器靈敏度換擋後,必須重新調零。
7)比色杯的配套性問題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結果失去意義(yi) 。在進行每次測試前均應進行比較。具體(ti) 方法如下;分別向被測的兩(liang) 隻杯子裏注入同樣的溶液,把儀(yi) 器置於(yu) 某一波長處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(ge) 池的透射比值調至100%,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的範圍內(nei) 則可以配套使用,若超出此範圍應考慮其對測試結果的影響。
三、分光光度計操作中容易出現的幾個(ge) 典型故障及其排除方法 1)儀(yi) 器不能調零。可能原因:
a)光門不能*關(guan) 閉。解決(jue) 方法:修複光門部件,使其*關(guan) 閉。
b)透過率“100%”旋到底了。解決(jue) 方法:重新調整“100%”旋鈕。 c)儀(yi) 器嚴(yan) 重受潮。解決(jue) 方法:可打開光電管暗盒,用電吹風吹上一會(hui) 兒(er) 使其幹燥,並更換幹燥劑。d)電路故障。解決(jue) 方法:送修理部門,檢修電路。
2)儀(yi) 器不能調“100%”。可能原因:
a)光能量不夠。解決(jue) 方法:增加靈敏度倍率檔位,或更換光源燈(盡管燈還亮)。 b)比色皿架未落位。解決(jue) 方法:調整比色皿架使其落位。 c)光電轉換部分老化。解決(jue) 方法:更換部件。 d)電路故障。解決(jue) 方法:調修電路。
3)測量過程中,“100%”點經常變動。可能原因:
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表麵有液滴。解決(jue) 方法:用擦鏡紙擦幹淨比色皿表麵,然後將其安放在比色槽的左邊,上麵用定位夾定位。 b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決(jue) 方法:送修。
4)數顯不穩。可能原因:
a)預熱時間不夠。解決(jue) 方法:延長預熱時間至30分鍾左右(部分儀(yi) 器由於(yu) 老化等原因,長時間處於(yu) 工作狀態時,也會(hui) 工作不穩)。 b)光電管內(nei) 的幹燥劑失效,使微電流放大器受潮。解決(jue) 方法:烘烤電路,並更換或烘烤幹燥劑。 c)環境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決(jue) 方法:改善工作環境。 d)光電管、電路等其它原因。解決(jue) 方法:送修。
四、提高分光光度計透射比檢定及使用精度的幾種方法 在分光光度計的使用或檢定中,透射比(吸光度)的準確度是衡量儀(yi) 器工作性能的一項重要指標,它的準確程度直接關(guan) 係到所測數據的可信性及科學性。所以提高此項指標的使用及檢定準確度顯得尤為(wei) 重要。下麵結合近年來對分光光度計的檢定或修理實踐,把如何提高透射比的測試及使用精度的幾點方法列表敘述如下:
五、小結 綜上所述,以下幾個(ge) 問題應引起儀(yi) 器操作人員注意:1)比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。有些使用者對這個(ge) 問題不夠重視,因操作不當造成偶然誤差,嚴(yan) 重影響分析結果。首先,應保證比色皿不傾(qing) 斜放置。稍許傾(qing) 斜,就會(hui) 使參比樣品與(yu) 待測樣品的吸收光徑長度不一致,還可能使入射光不能全部通過樣品池,導致測試比準確度不符合要求。其次,應保證每次測試時,比色皿架推拉到位。若不到位,將影響到測試值的重複性或準確度。後,還應保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命.2)幹燥劑的使用問題。幹燥劑失效將導致a)數顯不穩、無法調“0”點或“100%”點(電路或光電管受潮)。b)反射鏡發黴或沾汙,影響光效率、雜散光增加。鑒於(yu) 上述原因,分光光度計的放置地點應遠離水池等濕度大的地方、幹燥劑應定期更換或烘烤。3)儀(yi) 器的工作環境。應避免陽光直射、避免強電場、避免與(yu) 較大功率的電器設備共電、避開腐蝕性氣體(ti) 等。
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